Fri eller rörlig gränselektrofores är en typ av elektroforessteknik som förlitar sig på rörelsen av en skarp gräns Mellan en lösning som innehåller analyt (ämnet av intresse) och en buffertlösning . Denna teknik utvecklades av arne tiselius På 1930 -talet och fick honom nobelpriset i kemi 1948 .
Så här fungerar det:
1. Förberedelse: En lösning som innehåller analyt är skiktat ovanpå en buffertlösning i ett vertikalt glasrör. De två lösningarna har olika brytningsindex, vilket skapar en synlig gräns.
2. elektrofores: Ett elektriskt fält appliceras över röret. De laddade analytmolekylerna migrerar mot elektroden med motsatt laddning.
3. Migration: Analytmolekylerna rör sig genom buffertlösningen och skapar en rörlig gräns som kan observeras med schlieren optik . Denna teknik använder lätt brytning för att visualisera gränsen och mäta dess rörelse.
4. Analys: migrationsgraden av gränsen är proportionell mot analytens elektroforetiska rörlighet , som bestäms av dess laddning och storlek. Denna information kan användas för att identifiera och kvantifiera olika komponenter i analytblandningen.
Nyckelfunktioner hos fria eller rörliga gränselektrofores:
* Inget stödmedium: Analyten migrerar genom en flytande buffert, till skillnad från andra elektroforesstekniker som använder geler eller membran.
* skarp gräns: Närvaron av en distinkt gräns möjliggör exakt mätning av analytens migration.
* Kvantitativ analys: Tekniken är lämplig för kvantitativ analys av olika komponenter i en blandning.
* Begränsad upplösning: Jämfört med andra elektroforesstekniker har rörlig gränselektrofores en begränsad upplösning för att separera komplexa blandningar.
Applikationer:
* Proteinkarakterisering: Bestämma renheten och homogeniteten hos proteinlösningar.
* isoelektrisk fokusering: Identifiera den isoelektriska punkten för proteiner.
* serumproteinanalys: Studera sammansättningen av serumproteiner i kliniska tillämpningar.
Begränsningar:
* Begränsad upplösning: Jämfört med andra tekniker har den en lägre upplösningskraft för komplexa blandningar.
* Tekniska utmaningar: Kräver specialiserad utrustning och exakta experimentella förhållanden.
* Tidskrävande: Processen kan vara relativt tidskrävande.
Moderna tekniker:
Medan fri eller rörlig gränselektrofores var ett betydande genombrott under sin tid, har den till stor del ersatts av mer sofistikerade och mångsidiga elektroforesstekniker, såsom gelelektrofores och kapillärelektrofores . Dessa tekniker erbjuder högre upplösning, enklare drift och bredare tillämpbarhet.
Den historiska betydelsen av fri eller rörlig gränselektrofores förblir emellertid när den banade vägen för utvecklingen av moderna elektroforesstekniker som används allmänt inom olika områden idag.
