1. Cellkultur:
* Syfte: Detta är den vanligaste metoden för växande virus. Det handlar om att odla mottagliga celler i en laboratoriemiljö och sedan introducera viruset för dem.
* Process:
* cellinjen Val: Den lämpliga cellinjen väljs baserat på virusets tropism (preferens för att infektera specifika celltyper). Exempel inkluderar Vero -celler (apa njurar), HEK293 (mänsklig embryonisk njur) och MDCK (hundnjur).
* celltillväxt: De valda cellerna odlas i ett odlingsmedium som innehåller näringsämnen och tillväxtfaktorer.
* virusinokulation: Viruset läggs till cellkulturen, vilket gör att det kan infektera och multiplicera i cellerna.
* Övervakning: Kulturen observeras för tecken på virusinfektion, såsom cytopatiska effekter (förändringar i cellmorfologi) eller produktion av nya viralpartiklar.
* skörd: När viruset har nått en hög titer (koncentration) kan det skördas från cellkulturen för ytterligare studier eller användning.
* typer:
* monolagskultur: Celler bildar ett enda lager på botten av en odlingsrätt.
* suspensionskultur: Celler odlas i ett flytande medium och agiteras kontinuerligt.
2. Embryonerade ägg:
* Syfte: Denna metod används främst för att odla influensa och vissa andra virus.
* Process:
* äggberedning: Befruktade kycklingägg inkuberas under specifika perioder för att låta embryot utvecklas.
* virusinokulation: Viruset injiceras i ägget genom skalet och riktar sig till specifika membran eller vätskor i embryot.
* inkubation: De ympade äggen inkuberas för ytterligare viral replikation.
* skörd: De infekterade vätskorna (t.ex. allantoisk vätska) uppsamlas och används för ytterligare studier eller vaccinproduktion.
3. In vivo -system:
* Syfte: Även om det är mindre vanligt för laboratoriekulturen, kan vissa virus odlas i levande djur, vilket ger en mer komplex miljö som efterliknar deras naturliga infektionscykel.
* Process:
* Djurens urval: Djur som valts beror på virusets värdområde (t.ex. möss för influensa, apor för HIV).
* ympning: Viruset införs i djuret genom olika vägar, såsom injektion eller inandning.
* Övervakning: Djuret övervakas för tecken på infektion.
* vävnadssamling: Efter att viruset har replikerats samlas och analyseras vävnader för viral tillväxt.
* Etiska överväganden: Användningen av djur väcker etiska problem och är föremål för strikta förordningar.
4. Bakteriofagkultur:
* Syfte: Bakteriofager (virus som infekterar bakterier) odlas med hjälp av bakteriekulturer.
* Process:
* Bakterietillväxt: Den valda bakterievärden odlas i ett lämpligt buljongmedium.
* faginfektion: Bakteriofagen läggs till bakteriekulturen.
* replikering: Fagen infekterar och replikeras i bakterierna.
* skörd: Den faginnehållande buljongen samlas in för ytterligare studier eller applikationer.
Viktiga överväganden:
* Säkerhet: Att odla virus kräver stränga säkerhetsförfaranden för att förhindra oavsiktlig frisättning och infektion.
* sterilitet: Sterila tekniker är viktiga för att undvika föroreningar av kulturerna.
* Kvalitetskontroll: Regelbundna kontroller utförs för att säkerställa renheten och livskraften hos viruskulturerna.
Dessa metoder är avgörande för forskning, vaccinutveckling, diagnostisk testning och förståelse av virusens biologi.
