Experimentet
1. Material:
* enzym: Du behöver ett enzym som är lätt att arbeta med. Ett populärt val är Catalase , som finns i många levande saker (som potatis eller lever). Det bryter ner väteperoxid (H₂O₂) i vatten och syre.
* väteperoxid: Underlaget för katalas.
* buffertar: Lösningar som motstår förändringar i pH. Du behöver en rad buffertar för att skapa olika pH -nivåer. Vanliga val är:
* fosfatbuffert: För pH-intervall 6-8
* citratbuffert: För pH-intervall 3-6
* tris buffert: För pH-intervall 7-9
* Teströr: För att hålla reaktionsblandningarna.
* Graderade cylindrar: För att mäta vätskor exakt.
* Termometer: För att säkerställa att alla reaktioner inträffar vid samma temperatur.
* mätanordning: Detta kan vara en:
* examen cylinder för att mäta volymen av syrgasgas.
* spektrofotometer För att mäta minskningen av väteperoxidkoncentrationen över tid (mer avancerad).
2. Förfarande:
1. Förbered dina buffertar: Skapa en serie buffertar med olika pH -nivåer (t.ex. pH 4, 5, 6, 7, 8).
2. Ställ in dina reaktionsblandningar: I separata provrör kombinerar du följande:
* En specifik volym av din valda buffertlösning.
* En fast volym av enzymlösningen (katalas).
* En fast volym väteperoxidlösning.
3. Kontroll: Skapa en kontrollreaktion med samma ingredienser men med destillerat vatten istället för en buffert. Detta hjälper till att avgöra om själva bufferten påverkar reaktionen.
4. inkubera: Placera alla provrören i ett vattenbad eller inkubator för att upprätthålla en konstant temperatur (cirka 25 ° C).
5. Observera: Registrera reaktionshastigheten. Detta kan göras av:
* Mätning av mängden producerad syrgas: Observera bildningen av bubblor i provröret och använd en graderad cylinder för att mäta volymen gas som produceras under en viss tidsperiod.
* Mätning av minskningen av väteperoxidkoncentrationen: Använd en spektrofotometer för att mäta absorbansen av väteperoxid vid specifika våglängder.
6. Upprepa: Upprepa experimentet med samma enzym- och substratkoncentrationer men med olika pH -buffertar för att se hur reaktionshastigheten förändras.
3. Förväntade resultat:
* optimalt pH: Du bör upptäcka att enzymet har ett optimalt pH där det fungerar bäst. Detta är pH där enzymets aktiva ställe har rätt form att binda till underlaget effektivt.
* Minskad aktivitet: Vid pH -nivåer över eller under det optimala kommer enzymets aktivitet att minska. Detta beror på att pH kan påverka formen på det aktiva stället, vilket gör det mindre effektivt vid bindning till underlaget.
Nyckelkoncept:
* enzymer är proteiner: De har en specifik tredimensionell form som är avgörande för deras funktion.
* Aktiv webbplats: Den del av enzymet som binder till underlaget.
* optimalt pH: PH vid vilket ett enzym fungerar bäst.
* denaturering: Extrema pH -nivåer kan få enzymer att förlora sin form och bli inaktiva.
Dataanalys
* Grafera dina resultat, plotta pH-värdena på x-axeln och reaktionshastigheten (t.ex. volym av syregas som produceras eller minskar i väteperoxidkoncentrationen) på Y-axeln.
* Du bör se en klockformad kurva, med toppen som representerar det optimala pH för enzymet.
Låt mig veta om du har mer specifika frågor eller vill utforska andra experiment!
