Här är en uppdelning:
1. Förberedelser: Bakterieceller behandlas med en lösning som gör deras cellväggar mer genomsläppliga. Detta görs ofta med kalciumklorid, som hjälper DNA:t att komma in i cellen.
2. Introduktion: Det rekombinanta plasmid-DNA:t tillsätts sedan till de preparerade bakteriecellerna. Plasmid-DNA:t kan introduceras med hjälp av flera metoder, inklusive:
* Värmechock: Cellerna och plasmid-DNA blandas och utsätts sedan för en kort värmechock, vilket hjälper DNA:t att komma in i cellerna.
* Elektroporering: En kort elektrisk puls appliceras på cellerna, vilket skapar tillfälliga porer i cellmembranet som låter plasmiden komma in.
3. Transformation: När plasmiden väl är inne i cellen kan bakterierna ta upp DNA:t och införliva det i sitt eget genom. Denna process kallas transformation.
4. Urval: De transformerade bakterierna väljs sedan ut för att använda en teknik som kallas antibiotikaselektion. Plasmiderna innehåller vanligtvis en antibiotikaresistensgen, så endast bakterier som har tagit upp plasmiden kommer att kunna växa på ett medium som innehåller antibiotikumet.
Denna process gör det möjligt för forskare att introducera specifika gener i bakterier, vilket gör det möjligt för dem att producera önskade proteiner eller föreningar, bland andra applikationer.
