Temperatur
Enzymaktivitet har ett starkt förhållande till temperaturen. När temperaturen ökar ökar enzymaktiviteten också eftersom det finns en ökning av antalet kollisioner mellan de reaktiva molekylerna och enzymerna. Ökning av temperaturen leder vidare till en topp i enzymaktivitet. För humana enzymer är denna topptemperatur cirka 98,6 grader Fahrenheit, vilket är vår kroppstemperatur. En eventuell ytterligare temperaturökning leder till en minskning av enzymaktiviteten. Detta beror på denaturering av enzymproteinet, vilket är brytningen av molekylära bindningar inom proteinet. När dessa bindningar bryts, förändras formen av enzymet och det fungerar inte längre som en katalysator.
pH
Mätningen av surheten eller alkaliniteten hos en lösning kallas pH . Enzymer har utvecklats för att fungera vid specifika pH-värden och avvikelse från detta värde kommer att leda till en minskning av enzymaktiviteten. Detta beror på att ett högt eller lågt pH kan denaturera enzymer precis som höga temperaturer gör. De flesta av våra kroppsvätskor har ett neutralt pH på cirka 7,2, därför har humana enzymer den högsta aktiviteten vid detta pH.
Substratkoncentration
Ett substrat är en molekyl som ett enzym verkar på. Eftersom enzymer endast kan binda till ett enda substrat i taget, är deras aktivitet beroende av substratkoncentration. En initial ökning av substratkoncentrationen kommer att leda till en ökning av enzymaktiviteten eftersom det betyder fler substrat och enzymer kan para-up. En ytterligare ökning av substratkoncentrationen brukar inte öka aktiviteten eftersom enzymerna är mättade med substrat. Med andra ord finns det en linje som substraten måste vänta innan de når ett enzym.
Enzymkoncentration
Enzymaktivitet är också mycket beroende av sin egen molekylkoncentration. Med tanke på en godtycklig stor koncentration av substrat vid konstant pH och temperatur leder någon ökning av enzymkoncentration till en ökning av aktivitet. Detta leder till ett linjärt förhållande där enzymaktiviteten är direkt proportionell mot enzymkoncentrationen.