HPLC erbjuder en snabb, automatiserad och mycket noggrann metod för att identifiera vissa kemiska komponenter i ett prov, men det kan vara kostsamt, komplicerat och fungerar inte för alla prover. Medicinska, kriminaltekniska, miljö- och tillverkningslabor använder tekniken för att kvantifiera och separera kemikalierna i ett prov. HPLC har både fördelar och nackdelar jämfört med andra tekniker.
HPLC och liknande tekniker
Liksom andra former av kromatografi tillåter HPLC separering av kemiska beståndsdelar genom användning av en mobil fas och en stationär fas. Mobilfasen är flytande och den stationära fasen är fast. Eftersom de olika komponenterna rör sig i olika hastigheter skiljer de sig från varandra. Alternativa tekniker inkluderar kapillärelektrofores, där ämnen migrerar genom lösningar i ett elektriskt fält, och andra kromatografiska metoder som fast fasekstraktion, gaskromatografi och tunnskiktskromatografi.
Hastighet, effektivitet och noggrannhet -
Jämfört med andra kromatografiska tekniker, såsom TLC, HPLC är extremt snabb och effektiv. Den använder en pump snarare än tyngdkraften för att tvinga ett flytande lösningsmedel genom ett fast adsorberande material, med olika kemiska komponenter som separeras när de rör sig i olika hastigheter. Processen kan slutföras på ungefär 10 till 30 minuter, och den ger hög upplösning. Det är exakt och mycket reproducerbart. Eftersom det till stor del är automatiserat kan grundläggande HPLC-körningar utföras med minimal träning.
Kostnad och komplexitet
Trots dess fördelar kan HPLC vara dyrt och kräva stora mängder dyra organiska material. Tekniker som extraktion med fast fas och kapillärelektrofores kan vara billigare och ännu snabbare, särskilt för analys under god tillverkningssed. Även om det är relativt enkelt att använda befintliga HPLC-metoder kan det vara komplext att felsöka problem eller att utveckla nya metoder. Detta beror till stor del på uppsättningen av olika moduler, kolumner och mobila faser.
Känslighet och upplösning
Generellt är HPLC mångsidig och extremt exakt när det gäller att identifiera och kvantifiera kemiska komponenter. Med många involverade steg är HPLC: s precision i stor utsträckning beroende på processen som automatiseras och därför mycket reproducerbar. HPLC har låg känslighet för vissa föreningar, och vissa kan inte detekteras eftersom de är irreversibelt adsorberade. Flyktiga ämnen separeras bättre genom gaskromatografi.