1. Spårningsfärgning:
* Denna komponent låter dig visuellt spåra framstegen i elektrofores.
* Det är ett färgat färgämne som migrerar genom gelén i en förutsägbar hastighet.
* Vanliga exempel inkluderar:
* bromofenolblå: Migrerar med en liknande hastighet som ett 300-400 bp-fragment av DNA.
* xylen cyanol ff: Migrerar med en liknande hastighet som ett 4-6 kb-fragment av DNA.
2. Glycerol/sackaros:
* Denna komponent gör provtätare än buffertlösningen, så att den sjunker in i brunnen och diffunderar inte ut.
* Detta säkerställer att provet laddas korrekt och förblir koncentrerat längst ner i brunnen.
3. Buffertar:
* Dessa komponenter hjälper till att upprätthålla pH för provet och buffertlösningen under elektrofores.
* De säkerställer korrekt funktion av enzymerna som är involverade i processen.
* Exempel inkluderar Tris-Borate-EDTA (TBE) eller Tris-acetate-EDTA (TAE) buffertar.
4. Andra tillsatser (valfritt):
* SDS (natriumdodecylsulfat): Detta tvättmedel läggs ofta till proteinprover för att denaturera dem och täcka dem med en negativ laddning, vilket gör att de kan migrera baserat på deras storlek.
* reducerande agenter: Såsom ditiotreitol (DTT) eller ß-merkaptoetanol, läggs ibland till för att bryta disulfidbindningar inom proteiner, vilket ytterligare denaturerar dem.
Nyckelpunkter att komma ihåg:
* Den specifika sammansättningen av belastningsfärgning kan variera beroende på vilken typ av elektrofores som utförs (DNA, RNA eller protein).
* Valet av spårningsfärg bör vara lämpligt för storleksintervallet för molekylerna som analyseras.
* Laddningsfärgning bör användas sparsamt för att undvika att införa för mycket volym till brunnarna, vilket kan påverka bandupplösningen.
Låt mig veta om du har några andra frågor!
