Så här fungerar det:
1. Reaktion: DNS-reagenset, som innehåller 3,5-dinitrosalicylsyra, upphettas i närvaro av ett reducerande socker.
2. reduktion: Det reducerande sockret (som glukos, fruktos eller maltos) minskar de gulfärgade DN:erna till den brunfärgade 3-amino-5-NSA.
3. Färgbildning: Intensiteten hos den producerade bruna färgen är direkt proportionell mot koncentrationen av det närvarande reducerande sockret.
4. Mätning: Absorbansen av lösningen mäts vid en specifik våglängd (vanligtvis 540 nm) med användning av en spektrofotometer. Denna absorbans används sedan för att kvantifiera mängden reducerande socker som finns i provet.
Nyckelprinciper:
* redoxreaktion: Reaktionen mellan DNS och det reducerande sockret är en redoxreaktion, där DNS reduceras och sockret oxideras.
* Colorimetric Analys: Färgförändringen från gult till brun ger en visuell indikation på den reducerande sockerkoncentrationen.
* Beer-Lambert Law: Den uppmätta absorbansen är direkt proportionell mot koncentrationen av den färgade produkten, enligt Beer-Lambert-lagen.
Fördelar med DNS -metoden:
* Enkelt och billigt: Metoden är relativt enkel och använder lätt tillgängliga reagens.
* Hög känslighet: DNS -metoden är tillräckligt känslig för att upptäcka låga koncentrationer av reducerande sockerarter.
* allmänt tillämpligt: Det kan användas för att mäta reducerande sockerkoncentrationer i olika prover, inklusive biologiska vätskor, livsmedelsprodukter och industriprover.
Begränsningar av DNS -metoden:
* störningar av icke-reducerande sockerarter: Icke-reducerande sockerarter som sackaros reagerar inte med DNS.
* Specificitet: Metoden är inte specifik för ett enda reducerande socker. Den mäter det totala reducerande sockerinnehållet.
* Temperaturkänslighet: Reaktionshastigheten är känslig för temperaturvariationer.
Sammantaget är DNS -kolorimetriska metoden en allmänt använt, pålitlig och bekväm metod för att kvantifiera reducerande sockerinnehåll i olika prover. Emellertid bör dess begränsningar övervägas vid tolkningen av resultaten.
