• Home
  • Kemi
  • Astronomien
  • Energi
  • Naturen
  • Biologi
  • Fysik
  • Elektronik
  • Forskare använder guldsubstrat för att möjliggöra elektronkryomikroskopi på svåra proteiner

    Optisk mikroskop av ett ultrastabilt guldsubstrat som förbättrar bildupplösningen för elektronkryomikroskop. Varje hål, som används för att stödja frysta prover i elektronmikroskopets vakuum, är ungefär en mikrometer i diameter. Upphovsman:Christopher Russo, MRC-LMB

    (Phys.org) - Ett par forskare med Medical Research Council Laboratory of Molecular Biology vid University of Cambridge i Storbritannien har hittat ett sätt att övervinna problemet med många proteiner när de försöker studera dem med elektronkryomikroskopi. I deras tidning publicerad i tidningen Vetenskap , Christopher Russo och Lori Passmore beskriver hur de skapade en stödstruktur baserad på ett guldsubstrat som verkar lösa problemet.

    Som forskningsparet noterar, hittills har det varit svårt att lära sig mer om många proteiner med hjälp av elektronkryomikroskopi eftersom de rör sig runt under strålen, vilket resulterar i suddiga bilder och svårigheter att göra mätningar. De förklarar vidare att anledningen till att detta inträffar beror på instabilitet i kolsubstraten som vanligtvis används för att stödja prover under mikroskopet (som fryses för att öka stabiliteten.) I denna nya insats, forskarna beskriver sin nya teknik, som de tror erbjuder en väg runt detta problem genom att introducera stödsubstrat av guld. De utformade en stödstruktur som ungefär liknade dem som baserades på kolsubstrat och sträckte sedan en guldfilm med bara 500 ångstjocklek över ett fyrkantigt gitterstöd - de avslutade med att placera de frysta proteinerna i 1,2 mikrometer stora hål som de hade gjort i filmen. Filmen och guldstödet, de noterade, säkerställde enhetlig elektrisk konduktivitet och värmekontraktion när proteinproverna frystes.

    Forskningsparet tyder på att guld lämpar sig för applikationen av flera skäl - det är mycket beständigt mot strålning och därmed mer stabilt, det är kemiskt inert och är både biokompatibelt och elektriskt ledande.

    För att testa deras process, de skannade apoferritin - ett protein med ett sfäriskt komplex som har visat sig exceptionellt svårt att studera med elektronkryomikroskopi, med både den gamla tekniken och den nya som de hade utvecklat. De rapporterar att under testet med guldsubstratet, provet uppvisade mycket liten rörelse, (både i vertikal- och objektplanet) så att mycket bättre bilder kan tas än vad de kunde få när de använde ett kolsubstrat. De rapporterar också att på grund av den minskade rörelsen, de kunde flytta närmare provet när skanningarna gjordes. De tror att deras metod sannolikt kommer att fungera med en mängd andra proteiner som borde hålla andra forskare upptagna ganska länge.

    Konstnärlig återgivning av ett ultrastabilt guldsubstrat som förbättrar bildupplösningen för elektronkryomikroskop. Varje hål, som används för att stödja frysta prover i elektronmikroskopets vakuum, är ungefär en mikrometer i diameter. Upphovsman:Lesley McKeane/Christopher Russo, MRC-LMB

    © 2014 Phys.org




    © Vetenskap https://sv.scienceaq.com