Metoden innebär att en standardiserad pappersskiva impregnerad med en specifik koncentration av det antimikrobiella medlet placeras på ytan av en agarplatta inokulerad med testbakteriestammen. Plattorna inkuberas sedan för att möjliggöra bakterietillväxt och diffusion av det antimikrobiella medlet från skivan in i agarn.
Efter inkubation undersöks plattorna med avseende på närvaron av en klar hämningszon runt skivan. Hämningszonen representerar det område där bakterietillväxt har förhindrats på grund av medlets antimikrobiella aktivitet. Diametern på hämningszonen mäts och jämförs med standardreferenstabeller för att bestämma bakteriestammens känslighet eller resistens mot det antimikrobiella medlet.
Diskdiffusionsmetoden ger en kvalitativ eller semikvantitativ bedömning av antimikrobiell känslighet. Det kan användas för att screena för effektiviteten av olika antimikrobiella medel mot en viss bakteriestam, för att jämföra olika bakteriestammars mottaglighet för samma antimikrobiella medel och för att övervaka utvecklingen av antimikrobiell resistens.
Denna metod används ofta i kliniska laboratorier, forskningsmiljöer och läkemedelsindustrier för att utvärdera effektiviteten av antimikrobiella medel och vägleda lämplig antibiotikabehandling i klinisk praxis.