1. Antioxidant:Askorbinsyra är en potent antioxidant som hjälper till att skydda DNA från oxidativ skada. Under DNA-extraktionsprocedurer kan olika reagenser och miljöfaktorer generera reaktiva syrearter (ROS) som kan orsaka DNA-oxidation och strängbrott. Askorbinsyra avlägsnar dessa fria radikaler och minimerar DNA-skador och bevarar därigenom integriteten hos det extraherade genetiska materialet.
2. Reduktionsmedel:Askorbinsyra genomgår redoxreaktioner och fungerar som ett reduktionsmedel vid DNA-extraktion. Det hjälper till att upprätthålla den reducerande miljö som krävs för vissa DNA-extraktionsmetoder, särskilt de som involverar användning av vissa lysbuffertar eller kelatbildare. Genom att reducera oxidationsmedel som finns i extraktionsbuffertarna förhindrar askorbinsyra oxidation av DNA och underlättar dess effektiva extraktion.
3. Hämning av nukleaser:Nukleaser är enzymer som kan bryta ner DNA, vilket potentiellt äventyrar utbytet och kvaliteten på extraherat DNA. Askorbinsyra har hämmande effekter på vissa nukleaser, såsom DNaser och RNaser. Genom att hämma aktiviteten hos dessa nukleaser hjälper askorbinsyra till att bevara integriteten hos DNA-molekyler under extraktionsprocessen, vilket minskar risken för DNA-nedbrytning.
4. Förbättring av DNA-utfällning:Askorbinsyra kan förbättra utfällningen av DNA efter extraktion. Detta är särskilt relevant i metoder som använder alkoholutfällning för att isolera DNA. Askorbinsyra främjar bildningen av täta och kompakta DNA-fällningar, vilket gör det lättare att samla upp DNA-pelleten under centrifugering. Detta underlättar de efterföljande stegen av DNA-rening och nedströmsapplikationer.
Sammantaget bidrar askorbinsyra till skydd, stabilisering och effektiv extraktion av DNA genom att fungera som en antioxidant, reduktionsmedel, nukleashämmare och utfällningsförstärkare. Dess inkludering i DNA-extraktionsprotokoll hjälper till att säkerställa integriteten och kvaliteten hos det extraherade genetiska materialet för olika molekylärbiologiska tillämpningar.
