• Home
  • Kemi
  • Astronomien
  • Energi
  • Naturen
  • Biologi
  • Fysik
  • Elektronik
  •  Science >> Vetenskap >  >> Biologi
    Vilken roll har kosmiderna i rekombinenta DNA -teknik?
    Cosmids spelar en avgörande roll i rekombinant DNA -teknik, särskilt för kloning av stora DNA -fragment. Här är en uppdelning av deras funktion:

    Vad är kosmids?

    Kosmider är hybridvektorer som kombinerar egenskaper hos plasmider och bakteriofager. De är i huvudsak plasmider som bär en specifik DNA -sekvens som kallas en "cos" -ställe, som härrör från Lambda -fagen.

    Nyckelfunktioner:

    * Stor klonkapacitet: Cosmids kan rymma DNA-skär på 35-45KB, betydligt större än kapaciteten hos de flesta plasmider (vanligtvis 10-15KB). Detta möjliggör kloning av större gener eller hela genom.

    * Effektiv förpackning: "COS" -stället möjliggör förpackning av kosmid -DNA i lambda fagpartiklar. Denna process använder fagens förpackningsmaskiner, vilket möjliggör effektiv leverans av det rekombinanta DNA till bakterieceller.

    * Valbara markörer: Cosmids bär valbara markörer, som antibiotikaresistensgener, vilket möjliggör identifiering av bakterieceller som innehåller den rekombinanta kosmiden.

    Hur kosmider fungerar inom rekombinant DNA -teknik:

    1. DNA -fragmentinsättning: DNA -fragmentet som ska klonas sätts in i den kosmidvektorn vid en specifik begränsningsplats.

    2. Förpackning: Den rekombinanta kosmiden förpackas i Lambda -fagpartiklar med användning av ett specialiserat in vitro -förpackningsextrakt.

    3. Infektion: De förpackade fagpartiklarna infekterar bakterieceller och levererar den rekombinanta kosmiden.

    4. Replikering och urval: Kosmiden replikeras i bakteriecellen, och den valbara markören möjliggör val av bakterier som bär den rekombinanta kosmiden.

    5. Återvinning av klonat DNA: Det klonade DNA kan återvinnas från bakteriecellerna för ytterligare analys eller tillämpningar.

    Applikationer:

    * Genomkartläggning och sekvensering: Kosmider har använts i stor utsträckning i genomkartläggning och sekvenseringsprojekt på grund av deras förmåga att klona stora DNA -fragment.

    * genbibliotek: De används för att skapa genomiska bibliotek som innehåller stora fragment av DNA, som representerar hela genomet av en organisme.

    * Funktionell genomik: Kosmider kan användas för att studera funktionen hos stora gener eller genkluster.

    Fördelar med kosmids:

    * Hög kloningskapacitet: Möjliggör kloning av stora DNA -fragment.

    * Effektiv förpackning och leverans: Lambda -fagförpackningssystem säkerställer effektiv tillförsel till bakterieceller.

    * Valbara markörer: Underlätta identifiering av bakterier som innehåller den rekombinanta kosmiden.

    Begränsningar:

    * Stor storlek: De är större än plasmider, vilket kan vara en nackdel för vissa kloningsförfaranden.

    * Potentiell instabilitet: Stora skär kan ibland orsaka instabilitet i kosmiden.

    Sammanfattningsvis är kosmider kraftfulla verktyg inom rekombinant DNA -teknik, vilket möjliggör kloning och manipulation av stora DNA -fragment, vilket gör dem väsentliga för olika tillämpningar inom genomisk forskning, genterapi och bioteknik.

    © Vetenskap https://sv.scienceaq.com