Så här fungerar det:
1. Blodprovsförberedelse: Blodprovet behandlas vanligtvis med en lysbuffert för att bryta upp cellerna och frigöra innehållet, inklusive DNA.
2. centrifugering: Det lyserade provet centrifugeras sedan med höga hastigheter, vilket skapar en densitetsgradient.
3. sackarosgradient: En sackaroslösning är skiktad ovanpå det lyserade provet. Denna lösning har en lutning av ökande sackaroskoncentration, vilket skapar en gradient med ökande densitet.
4. Separation: Under centrifugering kommer olika cellulära komponenter att migrera till positioner i lutningen där deras densitet matchar den omgivande sackaroskoncentrationen. DNA, som är relativt tät, kommer att sedimentera vid ett specifikt skikt i lutningen.
5. Samling: Skiktet som innehåller DNA samlas sedan och renas sedan för att ta bort eventuella återstående föroreningar.
Därför är sackaros inte direkt involverad i nedbrytningen av celler eller isolering av DNA själv. Istället fungerar det som ett densitetsgradientmedium För att underlätta separationen av DNA från andra cellulära komponenter.
Viktig anmärkning: Medan sackaros används i vissa DNA -isoleringsprotokoll, kan andra metoder använda olika täthetsgradientmedier som cesiumklorid (CSCL).