* e. coli -bakterier: Detta fungerade som värdorganism.
* plasmid: Detta var ett litet, cirkulärt DNA som de isolerade från E. coli. De använde denna plasmid som en vektor för att bära den önskade genen.
* antibiotikaresistensgen: Detta var en gen från en annan organisme (troligen en annan bakterie) som gav resistens mot ett specifikt antibiotikum. Denna gen infördes i plasmiden.
Här är den grundläggande uppdelningen av experimentet:
1. isolering: De isolerade plasmid -DNA från E. coli och antibiotikaresistensgenen från en annan organisme.
2. Begränsningsenzym matsmältning: De använde restriktionsenzymer för att skära både plasmiden och antibiotikaresistensgenen på specifika platser.
3. ligering: De gick sedan in i de snittade ändarna av plasmiden och antibiotikaresistensgenen med användning av DNA -ligas, vilket skapade en rekombinant plasmid.
4. Transformation: De introducerade den rekombinanta plasmiden i E. coli.
5. Val: De använde antibiotika för att välja E. coli som framgångsrikt hade tagit upp den rekombinanta plasmiden.
Detta experiment visade genomförbarheten av genkloning , en grundläggande teknik inom modern bioteknik.
