1. Kontaminering under den ursprungliga provtagningen eller ympningen:
* Dålig aseptisk teknik: Detta är den vanligaste skyldigheten. Detta kan hända under:
* Samla det ursprungliga provet: Förorenade instrument, brist på korrekt sterilisering eller vidrör provet med osterila händer kan introducera utländska organismer.
* Inokulering av media: Droppar från andning eller hosta, vidrör agarytan med förorenade instrument eller lämnar kulturen utsatt för luft för länge kan alla införa föroreningar.
2. Kontaminering från själva media:
* osteril media: Om tillväxtmediet inte var ordentligt steriliserat kan det innehålla bakterier, svampar eller andra organismer som kunde växa tillsammans med din avsedda kultur.
* förorening under förberedelserna: Ostersila behållare, glas eller instrument som används för att förbereda media kan introducera föroreningar.
3. Kontaminering från miljön:
* luftburna organismer: Mikrobiella sporer och dammpartiklar kan sätta sig på exponerade ytor och introducera nya organismer.
* förorenade ytor: Arbetsbänkytor, inkubatorer eller till och med den omgivande luften kan hamna mikrober som kan hitta vägen in i din kultur.
* tvärföroreningar: Om du arbetar med flera kulturer kan de verktyg eller material som används för en kultur av misstag förorena en annan.
4. Intern förorening inom själva kulturen:
* mutation: Även om det är sällsynt, kan vissa organismer genomgå mutationer som förändrar sitt utseende eller tillväxtegenskaper, vilket leder till nya kolonyper.
* dissociation: Vissa bakteriearter kan producera olika kolonyper på grund av förändringar i deras cellytegenskaper eller genuttryck. Detta är mindre vanligt än förorening men kan vara en faktor.
Felsökning och förebyggande:
* Granska aseptisk teknik: Se till att du använder lämpliga steriliseringsmetoder för alla instrument och ytor.
* inspektera media: Se till att ditt media är sterilt före användning.
* Arbeta i en ren miljö: Håll din arbetsyta snygg och steril.
* Kontroll exponering för luft: Minimera tidskulturerna utsätts för miljön.
* Etikett och isoleringskulturer: Märk tydligt varje kultur för att förhindra korsföroreningar.
* Använd aseptiska tekniker när du arbetar med kulturer: Detta inkluderar att bära handskar, sterilisering av flamor och arbeta i en laminär flödeshuv (om det är tillgängligt).
Om du misstänker förorening är det bäst att börja om med färska medier och prov. Kom ihåg att upprätthålla sterilitet är avgörande för exakta och pålitliga resultat i mikrobiologi.
