1. Transparens: Många mikroorganismer är transparenta eller nästan transparenta, vilket gör dem svåra att skilja från det omgivande vattnet. Detta gäller särskilt för bakterier, som ofta är mycket små.
2. Rörelse: Vissa mikroorganismer är mycket mobila och kan snabbt gå ut ur synfältet, vilket gör det svårt att fokusera på dem. Detta gäller särskilt för protozoer och vissa typer av bakterier.
3. Ljusspridning: Vatten i sig kan sprida ljus och skapa en suddig bakgrund som döljer mikroorganismerna. Detta märks särskilt i tjocka preparat.
4. Fältdjup: Fältets djup i ett mikroskop är begränsat, vilket innebär att endast ett smalt plan för provet är i fokus vid varje given tidpunkt. Detta gör det svårt att se mikroorganismer som är belägna utanför fokalplanet, särskilt i en våt beredning där mikroorganismerna är suspenderade i ett relativt tjockt vattenskikt.
5. Lätt absorption: Vatten absorberar vissa våglängder av ljus, vilket kan göra det svårt att se vissa typer av mikroorganismer som bäst ses med specifika våglängder.
För att förbättra synligheten för mikroorganismer i våta beredningar:
* Använd en fläck: Att färga mikroorganismerna med ett färgämne kan öka sin kontrast och göra dem lättare att se.
* Justera ljuskällan: Att använda en mer fokuserad ljuskälla, till exempel en Darkfield -kondensor, kan förbättra synligheten genom att minska ljusspridningen.
* Justera kondensorn: Att sänka kondensorn kan öka fältets djup, vilket gör det lättare att se mikroorganismer på olika djup.
* Använd en täckningsslip: En täckskjutning kan hjälpa till att platta provet och minska tjockleken på vattenskiktet, vilket gör det lättare att fokusera på mikroorganismerna.
* Använd ett faskontrastmikroskop: Ett faskontrastmikroskop använder skillnaderna i brytningsindex mellan mikroorganismerna och det omgivande vattnet för att förbättra kontrasten. Denna teknik kan vara särskilt användbar för att se oskadade mikroorganismer.
Genom att använda dessa tekniker är det möjligt att förbättra synligheten för mikroorganismer i våta preparat och göra dem enklare att studera.