Bis (zink (II) -dipikolylamin) -funktionaliserade sub-2 μm kärnskalmikrosfärer för analys av N-fosfoproteom. Upphovsman:JIANG Bo och HU Yechen
Protein N-fosforylering spelar en kritisk roll i central metabolism och två/multikomponent signalering av prokaryoter. Vidare, den existerar som mellanprodukter för några viktiga enzymer hos däggdjur.
Dock, de nuvarande anrikningsmetoderna för O-fosfopeptider är inte föredragna för N-fosfopeptider på grund av P-N-bindningens inneboende labilitet under sura förhållanden. Därför, den effektiva N-fosfoproteomanalysen är fortfarande utmanande.
Nyligen, en forskargrupp som leds av prof. Zhang Lihua och Pro. Zhang Yukui från Dalian Institute of Chemical Physics (DICP) från Chinese Academy of Sciences (CAS) föreslog en snabb och effektiv N-fosfopeptidberikningsstrategi.
Deras studie publicerades i Naturkommunikation den 4 december.
Inspirerad av naturligt förekommande fosfataser, som tillhandahåller specifika Zn (II) -centrala enzymatiska fickor för att binda fosfatenheter av substrat, forskarna utformade bis (zink (II) -dipikolylamin) molekylär (DpaZn) för fosfatmålsigenkänning under neutrala förhållanden.
Kammar den snabba massöverföringsförmågan hos kiseldioxidmikrosfärer under 2 mikrometer, DpaZn-funktionaliserade sub-2 μm kärnskalskal kiseldioxidmikrosfärer (SiO 2 @DpaZn) konstruerades för berikning av N-fosfopeptider på spetsen under neutrala förhållanden. Totalt, 3, 384 N-pho-platser, innehållande 611 pH -värden, 1618 pLys och 1155 pArg, identifierades från HeLa -celllysat.
Den nya N-fosforylerade proteomanalysmetoden ger inte bara grundläggande data för fördjupning av dess biologiska funktion, men också tekniskt stöd för att främja utvecklingen av precisionsmedicin, syntetisk biologi och andra områden.
