Detta uppnås genom att använda en vakuumpump för att dra ut luften från kammaren, vilket underlättar effektiv ångsterilisering. Autoklavpundet anger mängden tryck, vanligtvis mätt i pund per kvadrattum (psi) eller bar, som vakuumpumpen kan generera.
Steriliseringsprocessens effektivitet beror i hög grad på förmågan att avlägsna luft från autoklavkammaren. Eftersom ånga vid lägre temperaturer är mindre effektivt för att döda mikroorganismer jämfört med högre temperaturer, är det viktigt att ta bort så mycket luft som möjligt för att säkerställa att ånga kan nå alla ytor och penetrera alla inslagna föremål eller porösa laster i kammaren.
De typiska vakuumnivåerna eller undertrycket som mäts i autoklaver under steriliseringscykeln sträcker sig från -13 till -30 psi (-0,9 till -2,1 bar). Genom att uppnå tillräckliga undertrycksnivåer kan ångan snabbt tränga igenom och effektivt sterilisera föremålen inuti autoklaven.