* nad+ måste vara ett oxiderande medel: NAD+ måste ha en högre affinitet för elektroner än molekylen som den oxiderar. Detta innebär att det måste vara mer elektronegativt och ha en större tendens att få elektroner.
* Molekylen som oxideras måste vara ett reducerande medel: Molekylen oxideras (som glukos) måste ha en lägre affinitet för elektroner än NAD+. Detta innebär att det måste vara mer elektropositivt och ha en större tendens att förlora elektroner.
* Reaktionen måste vara energiskt gynnsam: Överföringen av elektroner från molekylen oxideras till NAD+ måste frigöra energi. Detta säkerställer att reaktionen kan fortsätta spontant.
I huvudsak fungerar nad+ som en elektronacceptor, accepterar elektroner från en molekyl med högre energinivå (som glukos) och blir reducerad till NADH. Denna process är avgörande för många metaboliska vägar, inklusive glykolys och citronsyracykeln.