1. Provförberedelse:
- Blod eller andra vävnadsprover tas från individen.
- Vita blodkroppar isoleras från provet.
– Cellerna odlas i laboratoriemiljö för att stimulera celldelning.
2. Cellskörd och fixering:
- Vid lämpligt stadium av celldelningen (metafas) skördas cellerna och behandlas med en hypoton lösning för att svälla dem.
- De svullna cellerna fixeras sedan med ett fixativ, vanligtvis en blandning av kemikalier som metanol och ättiksyra, för att bevara cellstrukturerna.
3. Bildförberedelse:
- Fixerade celler släpps på objektglas och sprids ut för att skapa ett monolager av kromosomer.
- Objektglasen lufttorkas eller upphettas för att förbättra kromosomernas vidhäftning till glasytan.
4. Färgning:
– En färgningsteknik, som Giemsa eller trypsin-Giemsa, används för att färga kromosomerna.
- Fläckarna binder till specifika regioner av kromosomerna, vilket möjliggör identifiering av karakteristiska bandmönster.
5. Bandmönster:
– Bandmönstren på kromosomerna är unika för varje kromosompar och ger en visuell representation av kromosomens struktur och organisation.
– Dessa mönster används för kromosomidentifiering och analys.
6. Karyotypning:
- De färgade kromosomerna är ordnade och organiserade i ett standardformat enligt deras storlek, form och bandmönster.
– Detta organiserade arrangemang skapar en karyotyp, som i huvudsak är en fotografisk representation av en individs kromosomkomplement.
7. Kromosomanalys:
– Karyotyper undersöks i mikroskop av cytogenetiker eller andra utbildade yrkesmän.
– De analyserar antalet, strukturen och eventuella avvikelser i kromosomerna.
- Specifika numeriska eller strukturella variationer (t.ex. duplikationer, deletioner, translokationer) kan detekteras och studeras mer i detalj.
8. Genetiska markörer och FISK:
- Specialiserade tekniker som fluorescerande in situ hybridisering (FISH) kan användas för att ytterligare undersöka specifika genetiska loci eller identifiera kromosomala omarrangemang.
- FISH involverar användning av fluorescerande prober som binder till specifika DNA-sekvenser, vilket möjliggör visualisering av specifika kromosomregioner eller gener av intresse.
9. Tolkning och rapportering:
- Baserat på analysen av karyotypen och eventuella ytterligare tekniker som används, genereras en cytogenetisk rapport.
- Rapporten beskriver kromosomfynden, identifierar eventuella kromosomavvikelser eller variationer och ger relevant information för genetisk rådgivning, diagnos och hantering av genetiska störningar.
Det är viktigt att notera att karyotypanalys är ett specialiserat område, och tolkningen av kromosomavvikelser kräver expertis och kunskap om mänsklig genetik och cytogenetik.
