1. Fixering:
* Detta är det första och mest kritiska steget.
* Målet är att bevara vävnadsstrukturen och förhindra sönderdelning.
* Vanliga fixeringsmedel inkluderar formalin, glutaraldehyd och alkohol.
2. Uttorkning:
* Vatten avlägsnas från vävnaden med hjälp av en graderad serie alkohollösningar (vanligtvis 70%, 90%, 95%och 100%).
* Detta förbereder vävnaden för inbäddning i paraffinvax.
3. Clearing:
* Alkohol avlägsnas från vävnaden och ersätts med ett lösningsmedel som är blandbart med både alkohol- och paraffinvax (t.ex. xylen, toluen eller histoclear).
4. Inbäddning:
* Vävnaden infiltreras med smält paraffinvax under vakuum.
* Denna process gör att vaxet kan genomsyra vävnaden och stelna, skapa ett fast block som kan delas.
5. Sektionering:
* Paraffinblocket är trimmat och skivas i tunna sektioner (vanligtvis 4-10 mikrometer tjocka) med hjälp av en mikrotom.
6. Montering:
* Sektionerna är försiktigt monterade på glasskivor, vanligtvis med ett vattenlösligt lim.
7. Deparaffinisering:
* Paraffinvaxet avlägsnas från vävnadssektionerna med hjälp av en serie lösningsmedel (t.ex. xylen, toluen).
8. Rehydrering:
* Vävnadssektionerna rehydratiseras genom en graderad serie alkohollösningar (t.ex. 100%, 95%, 90%, 70%och vatten).
9. Färgning:
* Det är här vävnadskomponenterna visualiseras.
* Det finns många fläckar, var och en med sina egna egenskaper och applikationer.
* Exempel inkluderar hematoxylin och eosin (H&E) för allmän morfologi och speciella fläckar för specifika celltyper eller strukturer.
10. Montering:
* De färgade sektionerna är monterade med ett täckglas och ett monteringsmedium (t.ex. DPX, Permount).
11. Märkning:
* Sliderna är märkta med relevant information (patientnamn, datum, vävnadstyp, fläck).
Obs: Detta är ett standardprotokoll. Det kan finnas variationer beroende på den specifika vävnadstypen, färgningstekniker och forskningsapplikationer.
