• Home
  • Kemi
  • Astronomien
  • Energi
  • Naturen
  • Biologi
  • Fysik
  • Elektronik
  •  Science >> Vetenskap >  >> Biologi
    Vilka första steg tog forskare för att producera transgena bakterier som gjorde insulin?
    Här är en uppdelning av de viktigaste första stegen som forskare tog för att producera transgena bakterier som gjorde insulin:

    1. Isolera den humana insulingenen:

    * Identifiera genen: Forskare var först tvungna att fastställa den exakta DNA -sekvensen som koder för humant insulin. Detta handlade om att studera det mänskliga genomet och förstå strukturen hos insulinproteinet.

    * kloning av genen: När genen identifierades använde de tekniker som restriktionsenzymer och plasmider för att skära ut insulingen från humant DNA och sätta in det i ett litet, cirkulärt DNA som kallas en plasmid. Detta skapade en rekombinant DNA -molekyl.

    2. Välja en lämplig bakterievärd:

    * e. coli som arbetshäst: Bakterien * Escherichia coli * (E. coli) valdes som värdorganism. Det är en väl studerad, lätt manipulerad och snabbt reproducerande bakterie, vilket gör den idealisk för storskalig produktion.

    3. Infoga genen i bakterier:

    * Transformation: Den rekombinanta plasmiden innehållande den humana insulingenen infördes i E. coli -celler. Denna process, kallad transformation, involverade att skapa förhållanden där bakterierna skulle ta upp plasmiden.

    4. Välj för transgena bakterier:

    * antibiotikaresistens: Plasmiden innehöll ofta en gen för antibiotikaresistens. Detta gjorde det möjligt för forskare att enkelt identifiera bakterier som framgångsrikt hade tagit upp plasmiden. De skulle växa bakterierna i närvaro av antibiotikumet, och bara de bakterier med plasmiden skulle överleva.

    5. Uttrycka insulingenen:

    * promotorer och reglering: Plasmiden utformades så att den humana insulingenen skulle uttryckas (aktiveras) inuti E. coli. Detta handlade om att inkludera en promotorsekvens - en DNA -region som säger bakteriemaskineriet att börja läsa och transkribera insulingenen.

    6. Producerande och renande insulin:

    * storskalig jäsning: De transgena E. coli -bakterierna odlades i stora jäsningstankar, vilket gjorde att de kan producera stora mängder insulin.

    * rening: Efter jäsning behövde insulinet som producerades av bakterierna renas från resten av bakteriekomponenterna. Detta involverade olika tekniker som kromatografi och filtrering.

    Viktig anmärkning: Detta är en förenklad översikt. Processen involverade många tekniska detaljer, iterationer och utmaningar, och många lysande forskare bidrog till dess framgång.

    © Vetenskap https://sv.scienceaq.com