1. Principen:
* Biuretttestet förlitar sig på reaktionen mellan kopparjoner (Cu²⁺) i en alkalisk lösning med peptidbindningar som finns i proteiner.
* Peptidbindningar är kopplingarna mellan aminosyror, som utgör proteiner.
* När kopparjoner binder till peptidbindningarna bildar de ett komplex som absorberar ljus vid en specifik våglängd och ger en distinkt färgförändring.
2. Förfarande:
* Tillsätt en liten mängd av det okända provet (vätska eller fast) i ett provrör.
* Lägg till några droppar Biuret -reagens till provet. Biuret -reagens är en lösning som innehåller kopparsulfat och natriumhydroxid.
* Blanda innehållet i provröret försiktigt.
* Observera färgförändringen.
3. Resultat Tolkning:
* Positivt resultat: Om lösningen blir violet eller lila , det indikerar närvaron av proteiner.
* negativt resultat: Om lösningen förblir blå eller inte visar någon signifikant färgförändring, antyder den frånvaron av proteiner.
4. Begränsningar:
* Biuret -testet är inte specifikt för proteiner och kan också ge ett positivt resultat för föreningar som innehåller peptidbindningar, som peptider och vissa andra molekyler.
* Testet kanske inte är tillräckligt känsligt för att detektera mycket låga koncentrationer av proteiner.
5. Andra proteintester:
Medan Biuret -testet används i stor utsträckning, finns andra proteintester också tillgängliga, till exempel:
* ninHydrin Test: Upptäcker närvaron av aminosyror, som är byggstenarna av proteiner.
* xantoproteic test: Detekterar närvaron av aromatiska aminosyror, såsom tyrosin och tryptofan.
* Millons test: Detekterar närvaron av tyrosin, en aminosyra som finns i många proteiner.
Valet av test beror på det specifika proteinet som undersöks och den önskade känslighetsnivån.
