1. Skär DNA på specifika platser:
* Begränsningsenzymer känner igen och skär DNA vid specifika sekvenser som kallas restriktionsställen . Dessa platser är vanligtvis 4-8 baspar långa och är palindromiska (läs samma framåt och bakåt).
* Varje enzym har ett unikt igenkänningsställe, vilket möjliggör exakt inriktning av specifika DNA -sekvenser.
* När ett restriktionsenzym skär DNA lämnar det ofta efter sig klibbiga ändar , som är korta, enkelsträngade överhäng. Dessa klibbiga ändar kompletterar varandra och kan baspar med andra klibbiga ändar som genereras av samma enzym.
2. Gå med i DNA -fragment:
* Efter att DNA har klippts av ett restriktionsenzym kan olika fragment förenas med DNA -ligas .
* DNA -ligas tätar luckorna i DNA -ryggraden och skapar en ny, rekombinant DNA -molekyl.
* De klibbiga ändarna underlättar sammanfogningsprocessen, eftersom de naturligt anpassar och baspar och håller fragmenten ihop tills ligas kan försegla bindningen.
3. Applikationer i DNA -rekombination:
* kloning: Begränsningsenzymer är viktiga för att skapa rekombinanta DNA -molekyler som kan sättas in i vektorer (som plasmider) för kloning och uttryck.
* genredigering: Begränsningsenzymer används för att minska specifika regioner av DNA, vilket möjliggör införandet av nya gener eller korrigering av genetiska defekter.
* Genetiksteknik: Begränsningsenzymer är avgörande verktyg inom genteknik för att skapa genetiskt modifierade organismer (GMO) med önskade egenskaper.
Sammanfattningsvis fungerar restriktionsenzymer som mycket specifika molekylär sax och skär DNA på specifika platser. Denna exakta skärning, ofta genererande klibbiga ändar, möjliggör sammanfogning av olika DNA -fragment, vilket leder till skapandet av rekombinanta DNA -molekyler.
