1. Bär och replikerar utländskt DNA:
* replikationsurt (ORI): Vektorer har ett ursprung för replikationssekvens (ORI), vilket gör att de kan replikera oberoende inom värdcellen, vilket säkerställer multiplikation av det insatta DNA -fragmentet.
* Multiple Cloning Site (MCS): MCS är en region som innehåller en serie restriktionsenzymigenkänningsplatser, där det främmande DNA kan sättas in med hjälp av specifika begränsningsenzymer.
2. Urval och identifiering:
* Valbar markör: Vektorer innehåller utvalda markörgener, som antibiotikaresistensgener. Detta möjliggör val av celler som framgångsrikt har tagit upp vektorn, eftersom de kommer att överleva i närvaro av antibiotikumet.
* reportergen: Reportergener, som LACZ, möjliggör enkel identifiering av celler som innehåller vektorn. De uttrycker ett detekterbart protein som ger en visuell signal.
3. Uttryck av insatt DNA:
* Transkription och översättningssignaler: Vektorer bär ofta promotorer och andra reglerande element som säkerställer transkription och översättning av den insatta genen i värdcellen, vilket möjliggör proteinuttryck.
4. Specifika vektortyper:
* plasmider: Små cirkulära DNA -molekyler som vanligtvis används vid kloning. De replikeras lätt inom bakterier.
* Bakteriofager: Virus som infekterar bakterier, som kan modifieras för att bära främmande DNA.
* kosmids: Hybridvektorer som kombinerar funktioner hos plasmider och bakteriofager, vilket erbjuder hög kloningskapacitet.
* jäst konstgjorda kromosomer (yacs): Konstgjorda kromosomer som används för att klona stora DNA -fragment, vanligtvis finns i eukaryoter.
Sammanfattningsvis:
Kloningvektorer är avgörande för genkloning och manipulation, vilket ger de väsentliga verktygen för:
* bär och replikerar utländskt DNA.
* Att välja och identifiera celler som innehåller vektorn.
* Aktivera uttryck av det insatta DNA.
* Att välja lämplig vektortyp för önskad applikation.
De är avgörande för forskning, bioteknik och olika tillämpningar, inklusive genterapi, proteinproduktion och genteknik.
