Utvärdering av P22 mAbs genom Western blot-analys och blockerande enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA). A) Western blot-analys av P22-monoklonala antikroppars (mAbs) specificitet mot det riktade P22-proteinet. Blockbokstaven mellan två siffror i det nedre hörnet av varje bild representerar namnet på mAb, KDa =kilo Dalton, M =markör, fält-1 =rekombinant P22-protein laddat med 15 µl vid en koncentration av 1 mg/ml och fält- 2 =maltosbindande protein (MBP) som en negativ kontroll. Dessa resultat visade att alla mAbs var mycket specifika och kände igen det MBP-märkta P22-proteinet vid den förväntade vikten på omkring 66 KDa. B) Utvärdering av sju P22-mAbs (3B7, 3F6, 3F7, 3F8, 3E9, 4A6 och 4B6) för deras användning vid blockering av ELISA med sex positiva och fyra negativa grisserumprover mot afrikansk svinpestvirus (ASFV) och alla av dem hämmades att binda sitt målbelagda antigen av de positiva serumproverna med genomsnittlig PI> 92 %. Data representerar medelvärdet av resultaten från tre oberoende experiment. Kredit:Biosäkerhet och hälsa (2022). DOI:10.1016/j.bsheal.2022.04.002
Afrikansk svinpest (ASF) är en mycket smittsam och dödlig sjukdom hos grisar. På grund av komplexiteten hos ASF-viruset (ASFV) och olika kliniska former av sjukdomen krävs ett brett utbud av mycket effektiva och robusta sero-diagnostiska analyser.
Användningen av de mest antigena ASFV-proteinerna är mycket avgörande för att förbättra sero-diagnostiska analyser. För närvarande har endast ett fåtal mycket antigena rekombinanta proteiner testats och validerats för användning som reagens i ASF sero-diagnostiska analyser. Hittills har tre ELISA-kit baserade på de rekombinanta proteinerna P72, P30 och PP62 godkänts.
I en ny studie publicerad i Biosafety and Health baserat på det rekombinanta P22-proteinet utvecklades en mycket känslig, specifik och snabb P22 monoklonal antikroppsbaserad blockerande ELISA-analys (mAb-bELISA) för att detektera serumantikroppar inducerade av genotyp I och II ASFV för att detektera ASFV-antikroppar. Totalt 806 gris serumprover testades för att utvärdera prestandan av den diagnostiska analysen. Analysen kunde detektera ASFV-antikroppar så tidigt som 9 dagar efter infektion.
Baserat på denna studie kan den nya P22-mAb-baserade bELISA-analysen användas för snabb och exakt detektion av antikroppar mot ASFV, vilket kommer att spela en värdefull roll i inneslutningen och förebyggandet av ASF som ett alternativ till andra serologiska diagnostiska metoder. Denna studie kommer också att hjälpa forskare att ytterligare undersöka den immunogena betydelsen av P22-proteinet vid ASFV-infektion. + Utforska vidare
